人UroplakinII与小鼠UroplakinII启动子活性和组织特异性对比
毕业
| 全部作者: | 朱宏建 曾祥福 魏守顺 郭应禄 |
| 第1作者单位: | 武警总医院泌尿外科 |
| 摘要: | 膀胱癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤,基因治疗已成为治疗恶性肿瘤的重要方法之1。本研究旨在探讨人UroplakinII (UPII) 启动子与小鼠UPII启动子在人细胞株中的启动活性和组织特异性强弱。方法: 构建以人或小鼠UPII启动子为调控基因,以绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素激酶(Luc)为报告基因的重组质粒,应用脂质体转染技术,将重组质粒转染入膀胱移行细胞癌细胞(BIU-87)和肾癌细胞(GRC-1)、脐静脉血管内皮细胞(EC)、肺癌细胞(A549)、皮肤成纤维细胞(Hs27),利用共聚焦显微镜、流式细胞仪和微板检测仪观察细胞表达GFP和Luc的情况。结果: 含人UPII启动子重组质粒转染后,BIU-87表达GFP较多,10-15/HP,亮度较强,流式细胞仪测定表达量为10.1%。而GRC-1、EC细胞表达极少,0-5/HP,亮度暗,流式细胞仪测定表达量为0和1.8%。Luc在BIU-87中的表达量是其它组织细胞的2.2倍以上。含小鼠UPII启动子重组质粒转染后,BIU-87表达GFP较多,5~10/HP,亮度较强,流式细胞仪测定表达量为4.34%。而EC细胞表达极少,0~2/HP,亮度暗,流式细胞仪测定表达量分别为0%。Luc在BIU-87中的表达量是其他组织细胞的1.8~8.2倍,人UPII启动子与小鼠UPII启动子相比,无论是GFP还是Luc差异有显著性(P<0.01)。结论: 人UPII 启动子比小鼠UPII启动子在人细胞株中具有更高的启动活性和更低的组织特异性。为靶向性基因治疗膀胱癌提供了实验依据。 |
| 关键词: | UroplakinII;启动子;膀胱癌 远程下载(免费PDF全文) |
| 发表日期: | 2006年11月30日 |
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