检验技师考点：抗血清的纯化与保存
抗血清的纯化与保存：除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体(免疫球蛋白)标记反应和抗原抗体反应，抗血清可经过纯化以获得单一的机体(常为IgG)组分。
常用的纯化IgG的方法为饱和硫酸胺盐析和层析法。蛋白质在不同的盐浓度的溶液中，其溶解度不一样，盐离子干扰蛋白质和水分子间氢键形成，因为水—盐结合比水—蛋白质结合更稳定，蛋白质即可从溶液中沉淀出来。
蛋白质分子越大，沉淀时所需盐离子浓度越低。
免疫球蛋白(Mr 1.5×105)比血清中主要蛋白质白蛋白(M r 6.7×104)的分子大得多，抗体在30%—50%饱和度的硫酸盐中析出，而白蛋白需在70%—80%饱和度才析出，因此常用33%饱和度的硫酸胺纯化血清中的IgG.盐析时为了减少抗体变性，需在4℃进行，同时用pH8.0缓冲液稀释抗血清，以减少蛋白浓度过高而发生共沉淀。
铵盐的溶解度不随温度变化而明显改变，0℃和25℃仅差3%，而钠盐则相差5倍，因此常在低温沉淀时用铵盐，室温沉淀用钠盐。铵盐对抗体的标记反应(如FITC和biotin标记时)有一定的干扰作用。
【检验技师考点：抗血清的纯化与保存】相关文章：
检验技师考点：纯化抗体01-15
检验技师考点：IgG纯化01-15
检验技师/士考点：抗血清的检定01-17
检验技师考点：抗凝剂肝素01-15
检验技师考点：抗原稀释12-16
检验技师考点：膀胱粘膜白斑01-15
检验技师考点：胱氨酸尿01-15
检验技师考点：抗原抗体反应01-15
检验技师考点：尿比密检查01-15
2017检验技师考试化学检验必备考点10-17