小议应用微柱凝胶法鉴定新生儿血型
【摘要】 目的探讨卡式微柱凝胶血型鉴定法在鉴定新生儿血型中的应用。方法选取100份新生儿外周血标本，采用盐水试管法和卡式微柱凝胶法同时进行ABO和Rh(D)血型鉴定。结果试管法正定型符合率98%，微柱凝胶法正定型符合率100%。结论微柱凝胶法检测新生儿的ABO和Rh(D)血型时优于传统试管法。
【关键词】 微柱凝胶法;新生儿;血型
由于新生儿的ABO血型抗原较成年人弱，约只有成人的1/4，且含有来自母体的抗体，免疫反应相对较弱[1]，故血型血清学的检测难度较大，所以新生儿血型只能由检测红细胞抗原正定型来鉴定其ABO血型。长期以来人们一直沿用的手工法操作不易标准化，且干扰因素较多，血型错检时有发生，1986年Lapierre发明了微柱凝胶技术并用于鉴定血型，该方法具有易于自动化、标准化、反应结果可靠和特异性强等特点，在许多医院和血站被应用[2] 。该系统的基本原理是通过微小的凝胶颗粒构成的滤网在系统内控制离心的条件下，将凝集的红细胞和游离的红细胞分离开来，从而形成不同的反应图谱，再通过系统的自动判读装置判断血型[3]。自2010年开始本院检验科采用该技术鉴定新生儿血型，在结果的准确性和操作的方便性上都有了很大程度的提高。
1材料与方法
1.1标本来源
100例标本来自2010年1月—2011年8月本院新生儿病房，每名新生儿抽EDTA抗凝血2ml。
1.2试剂与仪器
微柱凝胶血型卡(DianaGel Confirm)、离心机由北京斑珀斯技术技贸有限公司提供。抗A、抗B血型定型试剂由长春生物制品研究所提供，Rh抗D血型定型试剂由上海血液生物制品研究所提供。
1.3检测方法
盐水试管法参照《全国临床检验操作规程》[4]，取受检者5%红细胞悬液20μl，抗-A、抗-B、抗-D血清各100μl，混匀，3200r/min离心15s，显微镜观察结果，镜下凝集者应判为阳性。
1.4微柱凝胶法
将病人EDTA抗凝血充分离心3000转/5min，取红细胞50μl加生理盐水1ml制成5%的红细胞悬液。撕开卡上的锡纸膜，在A-B-D-ctl四个孔内分别悬空加入病人5%红细胞悬液10μl，将卡放在专用离心机中离心9min，离心结束后在白色背景下观察结果。
2结果
微柱凝胶法正定型结果凝集强度全部达到3+以上，错检率为0;盐水试管法凝集强度达到3+以上为95%，结果为散在凝集需借助显微镜确定为3%，有2例错检，后经证实与微柱凝胶法结果一致。
3讨论
卡式微柱凝胶法是1986年Lapierre发明的一项免疫学检测新技术，是微柱凝胶技术与以往血型鉴定技术相结合的产物，其敏感度高，可用于临床困难血型的鉴定，经过不断的改进和大量的临床应用，在许多发达国家此技术已作为常规的红细胞血型血清学检测技术应用于临床。新生儿的ABO血型抗原较成人弱，约只有成人的1/4 ，其ABO抗原弱的原因并非缺少糖苷转移酶，而是由于红细胞上酶的底物少。新生儿可以从母亲获得IgG ABO抗体，但IgM ABO抗体却在出生3～6个月后才合成[5]。微柱凝胶正定型具有检测敏感性高、特异性强、结果准确、易于观察、影响因素少的特点，特别是对抗原较弱的'新生儿红细胞抗原检测更表现出其优越性。试验中出现的3例抗原性弱的、需借助显微镜确定的标本，就都是由于A或B抗原极弱，用传统的试管法鉴定血型时，传统试管法的镜下凝集需借助显微镜观察，操作繁杂且有一定的困难。微柱凝胶法能用肉眼直接观察到极弱的阳性反应(±)，能使肉眼不易察觉的凝集(镜下1～3个红细胞的凝集)明显化。本次实验结果表明，对于血型抗原减弱的新生儿，应用微柱凝胶法能够成功准确地检测出其ABO血型，较之传统的试管法准确、简便、快捷、安全，也减少了实验人员接触血液的机会，易于批量使用，尤其适合儿科和新生儿科标本的检测。
【参考文献】
1罗春丽，刘体全. 临床检验基础，第2版. 北京:人民卫生出版社，1997：97.
2Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al.The gel test:a newway to detect red cell antigen antibody reactions.Transfusion，1990，30:109-113.
3Tills D，Bushrod J，Ward DJ，et al.Typing of normal and variant red cells with ABO，RH，and Kell typing reagents using a gel typing system.Immunohematology，1991，7:94.
4叶应妩，王毓三，申子瑜. 全国临床检验操作规程，第3版.南京：东南大学出版社，2006：246.
5Mollison PL.Blood transfusion in clinical medicone.London:Blackwell Scientific Publication，1979：243.
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