毛钩藤叶对中枢抑制作用的初步研究

时间：2020-08-04 18:38:49 药学毕业论文我要投稿

毛钩藤叶对中枢抑制作用的初步研究

　　钩藤是中医临床治疗肝风内动，惊痫抽搐的常用中药，下面是小编搜集的一篇关于毛钩藤叶对中枢抑制作用探究的论文范文，欢迎前来阅读借鉴。

毛钩藤叶对中枢抑制作用的初步研究

　　【摘要】 目的研究毛钩藤叶对中枢神经系统的药理作用。方法采用小动物自主活动测定仪测定小鼠的自主活动。采用戊巴比妥钠阈下催眠实验及戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验，观察毛钩藤叶的镇静催眠作用。结果钩藤组(12 g/kg)与毛钩藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3个剂量组均能使小鼠自发活动减少，使戊巴比妥钠阈下睡眠剂量致小鼠入睡个数增多，并延长戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间，且以毛钩藤叶高剂量组效果最为明显。结论毛钩藤叶具有显著的中枢抑制作用。

　　【关键词】钩藤; 毛钩藤叶; 自主活动; 催眠作用

　　钩藤具有清热平肝、息风定惊之功效，是中医临床治疗肝风内动，惊痫抽搐的常用中药。2005年版《中国药典》规定中药钩藤为茜草科植物钩藤Uncaria rhyuchophylla ( Miq. ) Jacks.，华钩藤U. siueusis (Oliv. ) Havil.，大叶钩藤U . macrophylla Wall.，毛钩藤U. hirsute Havil.，无柄果钩藤U. sessillfructus Roxb.的干燥带钩茎枝[1]。钩藤中含有多种吲哚类生物碱,主要有钩藤碱,异钩藤碱[2～4]。最近的研究发现钩藤叶中也含有钩藤碱和异钩藤碱[5～6]。目前对钩藤的研究多集中于该植物带钩的茎枝，而对于该植物的其他部位研究报道较少。为开发和利用钩藤叶资源，本文对毛钩藤叶的中枢神经系统作用进行初步的药理学研究。

　　1 材料与仪器

　　1.1 药材毛钩藤嫩枝采自本校中药圃，经本校中药鉴定教研室张宏伟副教授鉴定为茜草科植物毛钩藤Uncaria hirsute Havil.。将毛钩藤叶与带钩茎枝分别剪下，在60℃以下烘干，将两种药材分别用75%乙醇回流提取两次，回收乙醇后，减压浓缩制成1∶1(1g/ml)醇提取液。放入4℃冰箱中保存备用，使用前用蒸馏水配置成所需浓度。

　　戊巴比妥钠由中国医药集团上海化学试剂公司生产，批号F20050405。95%乙醇、无水乙醇等试剂由广东汕头西陇化工厂生产。

　　1.2 动物 SPF级昆明种小鼠, 雌雄各半, 体重20～25 g, 由南方医科大学实验动物中心提供，动物合格证号: SCXK粤2006-0015。

　　1.3 仪器 YLS-1A多功能小动物自主活动记录仪，山东省医学科学院设备站提供。

　　2 方法

　　2.1 小鼠自发活动实验[7] 昆明种小鼠50只，雌雄各半，禁食12 h，饮水不限。将小鼠随机分为5组，即空白对照组(等容量生理盐水组)，钩藤(即毛钩藤带钩茎枝，下同)组(12 g/kg)和毛钩藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3剂量组。每组10只动物。将各组小鼠放入YLS-1A多功能小动物自主活动记录仪中, 适应5 min后，测定小鼠给药前的自主活动次数, 记录时间为5 min。记录时室内保持安静。然后按剂量给各组小鼠灌胃给药(ig)。分别于给药后30，60 min各测定1次自发活动数，记录5min内各组小鼠的活动数。

　　2.2 戊巴比妥钠阈下睡眠剂量诱导小鼠入睡实验[8] 取昆明种小鼠50只，雌雄各半。将小鼠随机分为5组，即空白对照组(等容量生理盐水组)，钩藤组(12 g/kg)和毛钩藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3剂量组。按各组剂量给小鼠ig给药，药后60 min后给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥钠30 mg/kg，以小鼠翻正反射消失1 min以上为入睡标准，记录15 min内各组小鼠的入睡个数。

　　2.3 戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验[8] 取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组。将小鼠随机分为5组，即空白对照组(等容量生理盐水组)，钩藤组(12 g/kg)和毛钩藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3剂量组。按各组剂量给小鼠ig给药，药后60 min后给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥钠50 mg/kg，然后记录各组小鼠的睡眠时间(以给药后小鼠翻正反射消失为入睡时间，翻正反射消失至恢复为睡眠时间)。

　　2.4 统计学处理实验数据以±s表示，应用SPSS 13.0统计软件进行完全随机设计资料的单因素方差分析或两独立样本t检验，组间多重比较方差齐时用LSD方法，不齐时用Games- Howell方法。P<0.05表示差异有统计学意义。计数资料采用χ2检验。

　　3 结果

　　3.1 药物对小鼠自发活动的`影响由表1可见，空白对照组给药前后小鼠自发活动次数未见明显变化(P>0.05)。钩藤组和毛钩藤叶低、中、高3个剂量组给药后小鼠的自发活动明显减少，与给药前相比，均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。钩藤组和毛钩藤叶中、高剂量组给药后小鼠的自发活动次数与空白对照组相比，均有非常显著差异(P<0.01)。毛钩藤叶对小鼠自发活动的抑制随剂量加大而加强，毛钩藤叶高剂量组与钩藤组比较差异非常显著(P<0.01)。表1 各组小鼠自发活动次数与空白组比较，*P<0.01;与给药前比较，△P<0.05，△△P<0.01;与钩藤组比较，▲P<0.01;n=10

　　3.2 药物对戊巴比妥钠阈下睡眠剂量致小鼠入睡的影响结果表明，空白组腹腔注射戊巴比妥钠30 mg/kg后小鼠无一睡眠。钩藤组和毛钩藤叶低、中、高3个剂量组均有小鼠入睡，各组小鼠入睡个数经χ2检验表明，χ2=16.586，ν=4，P=0.002(双侧)，差异有显著性意义，可认为5个实验组之间的差异有显著性意义，其中毛钩藤叶高剂量组小鼠的入睡个数最多。见表2～3。表2 戊巴比妥钠阈下剂量诱导睡眠的结果表3 戊巴比妥钠阈下剂量诱导睡眠的统计结果

　　3.3 毛钩藤叶对戊巴比妥钠睡眠时间的影响由表4可见，钩藤及毛钩藤叶给药后可使戊巴比妥钠阈剂量所致小鼠睡眠时间延长，钩藤组及毛钩藤叶低剂量组可使睡眠时间延长，但与空白组比较无显著性差异(P>0.05)。毛钩藤叶中、高剂量组与空白组比较均有显著差异(P<0.05或P<0.01)。毛钩藤叶3个剂量组的小鼠睡眠时间随剂量加大而延长。毛钩藤叶高剂量组与钩藤组比较差异非常显著(P<0.01)。表4 药物对戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间的影响

　　4 讨论

　　本研究主要考察毛钩藤叶对中枢神经系统的抑制作用。采用了小鼠自发活动实验、戊巴比妥钠阈下睡眠剂量诱导小鼠入睡实验及戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验来评价毛钩藤叶的镇静催眠作用，并与毛钩藤带钩茎枝进行对比。从实验结果可知，毛钩藤叶低、中、高3个剂量组给药后小鼠的自发活动明显减少，钩藤组和毛钩藤叶中、高剂量组与空白组相比，差异非常显著。毛钩藤叶对小鼠自发活动的抑制随剂量加大而加强，毛钩藤叶高剂量组与钩藤组比较有差异，表明毛钩藤叶的镇静作用比钩藤茎枝明显。毛钩藤叶高剂量组还能明显增加戊巴比妥钠阈下睡眠剂量诱导入睡的小鼠个数，并能明显延长戊巴比妥钠阈剂量的小鼠睡眠时间，与钩藤组相比较有差异。提示高剂量的毛钩藤叶对中枢的抑制作用较为显著。

　　实验结果表明毛钩藤叶具有明显的镇静催眠作用，其作用强度与剂量有一定关系。但毛钩藤叶抑制中枢神经系统的物质基础及作用机理仍有待深入研究。

　　【参考文献】

　　[1] 国家药典委员会. 中国药典，Ⅰ部[S].北京: 化学工业出版社, 2005: 180.

　　[2] 张峻,杨成金,吴大刚. 钩藤的化学成分研究(Ⅱ) [J].中草药, 1998, 29(10): 649.

　　[3] 张峻,杨成金,吴大刚. 钩藤的化学成分研究(Ⅲ) [J].中草药, 1999, 30(1): 12.

　　[4] 许丹丹,莫志贤. 钩藤与绒毛钩藤的化学成分及药理作用[J].中药新药与临床药理, 2005, 16(4): 311.

　　[5] 汪冰,袁丹,马斌,等. 钩藤叶化学成分的研究[J].中国药物化学杂志, 2006, 16(6): 369.

　　[6] 辛文波,侴桂新,王峥涛. 毛钩藤叶的化学成分[J].中国天然药物, 2008,6(4): 262.

　　[7] 徐叔云,卞如濂, 陈修. 药理实验方法学, 第2版[M].北京:人民卫生出版社, 1991: 651.

　　[8] 陈奇. 中药药理研究方法学, 第2版[M].北京:人民卫生出版社, 2006：657

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