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农杆菌介导的巴西蕉横切薄片遗传转化体系研究
论文摘要: 香蕉是世界第四大粮食作物,在世界粮食生产中占有重要的地位.病虫危害与霜冻（略）灾害都严重威胁着香蕉产业的发展.由于香蕉倍性多样、高度不育的特性,多年来利用传统育种进行品种改良的研究收效甚微.随着分子生物学的发展,利用基因工程手段将各种优良基因导入香蕉,对于（略）病虫害、高产、优质的香蕉种质意义重大. 本实验详细研究了香蕉再生体系建立的条件、农杆菌侵染条件及不同的筛选方法,并以ppt作为筛选标记,将置于Ubi启动子控制下的GUS基因通过根瘤农杆菌介导的方法导入香蕉,最终建立了以巴西蕉(Musa（略）isiaca.,AAA Group cv. Brasil)低代试管苗横切薄片为受体的香蕉遗传转化体系.主要的研究结果有: 1.建立香蕉低代试管苗横切薄片与雄花切片的间（略）生体系:香蕉低代试管苗横切薄片与雄花切片都有很高的间接器官发生能力,是建立香蕉高效间接器官发生再生体系的良好外植体材料.不（略）蕉不同外植体间接器官发生的影响实验表明:低代试管苗横切薄片在0.5-1.0mg/L 2、4-D+4-6mg/L 6-BA条件下,雄花切片在0.5-1.0 mg/L 2...
Banana is the fourth big grain crop in the world and （omitted）mportant status in world grai（omitted）on. Many biotic and abiotic stresses such as plant disease, frost, and typhoon threatened （omitted）the production of banana. It is little effect for the improvement of new M. paradisiaca varieties by traditional breeding method, due to the di（omitted）dy and highly sterile characteristic of M. paradisiacal. With the development of molecular biology, it is （omitted）gnificant to obtain transgenetic ba...
目录:摘要 第4-6页
Abstract 第6-7页
目录 第8-11页
序言 第11-35页
·香蕉生物技术研究现状 第11-25页
·香蕉种质资源 第13-14页
·种 第13页
·品种 第13-14页
·遗传性状 第14-15页
·现代生物技术应用于香蕉遗传育种的研究进展 第15-25页
·香蕉基因组测序 第15页
·香蕉快速繁殖技术研究进展 第15-17页
·香蕉突变育种研究进展 第17-18页
·香蕉体细胞杂交育种研究进展 第18页
·香蕉基因工程育种研究进展 第18-25页
·根瘤农杆菌介导的香蕉遗传转化的研究现状 第25-33页
·农杆菌介导的香蕉遗传转化研究的回顾 第25-27页
·影响农杆菌介导香蕉转化的几个重要因素 第27-33页
·侵染过程 第27-28页
·农杆菌转化的受体材料 第28-29页
·Vir区的活化 第29页
·菌液浓度及侵染时间对转化效率的影响 第29-30页
·预培养与共培养对转化效率的影响 第30页
·不同基因型对农杆菌转化的影响 第30页
·不同农杆菌菌株类型的影响 第30-31页
·启动子 第31-32页
·脯氨酸与硝酸银 第32-33页
·研究目的与意义 第33-34页
·技术路线 第34-35页
材料和方法(Materials and methods) 第35-46页
·材料 第35-36页
·外植体材料 第35页
·菌种与质粒 第35页
·试剂 第35-36页
·主要仪器设备 第36页
·方法 第36-46页
·香蕉遗传转化体系的研究 第36-41页
·巴西蕉高效遗传转化受体系统的研究 第36-40页
·根瘤农杆菌侵染条件的研究 第40-41页
·根瘤农杆菌介导GUS基因遗传转化香蕉的研究 第41-46页
·培养基配方 第41-42页
·农杆菌菌液的准备 第42页
·转化材料的预处理 第42页
·农杆菌菌液浸染外植体及共培养 第42-43页
·抑菌 第43页
·抗性苗的筛选 第43页
·抗性苗的生根与移栽 第43页
·抗性苗的检测 第43-46页
结果与分析(Results and Analysis) 第46-64页
·不同继代次数对巴西蕉试管苗茎段薄层切片出芽率的影响 第46页
·巴西蕉高效间接器官发生再生体系研究 第46-50页
·,4-D对巴西蕉不同外植体诱导脱分化愈伤的影响 第46-47页
·生长素和分裂素对巴西蕉不同外植体器官分化的影响 第47-49页
·花菜体可以通过间接器官再生途径实现高效增殖 第49-50页
·不同抑菌剂和筛选剂对香蕉受体系统的影响结果 第50-52页
·抑菌剂对巴西蕉低代试管苗茎段薄层切片芽再生的影响 第50-51页
·筛选剂对巴西蕉低代试管苗茎段薄层切片芽再生的影响 第51-52页
·D-甘露糖和D-木糖对巴西蕉芽分化与再生的影响 第52-55页
·D-甘露糖对巴西蕉芽分化与再生的影响 第52-53页
·D-木糖对巴西蕉芽分化与再生的影响 第53-55页
·根瘤农杆菌遗传转化条件的探索 第55-60页
·共培养时间对GUS基因瞬时表达率的影响 第55-56页
·共培养温度对GUS基因瞬时表达率的影响 第56页
·农杆菌菌液浓度对GUS基因瞬时表达率的影响 第56-57页
·侵染时间对GUS基因瞬时表达率的影响 第57页
·乙酰丁香酮对GUS基因瞬时表达率的影响 第57-58页
·重悬液pH值对GUS基因瞬时表达率的影响 第58-59页
·巴西蕉低代试管苗横切薄片侵染及GUS基因瞬时表达情况 第59-60页
·根瘤农杆菌介导GUS基因转化巴西蕉 第60-64页
·转化材料的筛选 第60页
·转化材料筛选后的再生与移栽 第60-62页
·抗性植株总DNA的提取结果 第62页
·抗性植株GUS基因PCR结果 第62页
·抗性苗GUS组织化学染色检测 第62-64页
讨论(Discussion) 第64-74页
·香蕉遗传转化受体系统 第64-65页
·香蕉间接器官发生再生体系 第65-67页
·外植体材料对香蕉间接器官发生再生体系的影响 第65-66页
·激素对香蕉间接器官发生再生体系的影响 第66页
·间接器官发生再生体系研究对香蕉育种技术的影响 第66-67页
·抑菌剂与筛选剂对香蕉遗传转化体系的影响 第67-68页
·D-甘露糖与D-木糖对香蕉芽再生的影响 第68页
·农杆菌侵染条件对遗传转化的影响 第68-72页
·农杆菌菌种、重悬液浓度、侵染时间、共培养温度与时间对遗传转化的影响 第68-71页
·乙酰丁香酮(AS)对遗传转化的影响 第71页
·重悬液pH值对遗传转化的影响 第71-72页
·抗性植株的筛选方法 第72页
·抗性植株的检测与鉴定 第72-74页
结论 第74-75页
参考文献 第75-83页
附录 第83-85页
致谢 第85页
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