谈蜂房提取物对荷瘤鼠放化疗的增效作用

时间：2024-07-20 15:12:02 药学毕业论文

谈蜂房提取物对荷瘤鼠放化疗的增效作用

摘要：　目的：观察蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠的放化疗增效作用。方法：移植H22肝癌的小鼠模型，给予蜂房乙醇提取物与化疗和放疗联合，计算抑瘤率及增效率。结果：蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠放化疗的抑瘤率分别达60.5%和61.2%，增效率分别为33.3%和32.6%。结论：蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠的放化疗均有明显的增效作用。

关键词：肝肿瘤，实验性；小鼠；蜂房提取物； H22肝癌

蜂房是具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗溃疡、抗肿瘤及免疫调节等多种药理作用的中药［1］。有研究表明，蜂房及其提取物对胃癌、肝癌、子宫颈癌等多种肿瘤细胞的体外生长均有抑制作用［2］。前期研究表明蜂房乙醇提取物对小鼠S180实体瘤及艾氏腹水癌的体内生长也有明显的抑制作用（另文待发表）。2006年9月～2007年7月进一步研究了蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠放化疗的增效作用。
　　1 材料与方法
　　1.1 蜂房提取物的制备　　
　　称取蜂房（购于天益堂药房）100 g，用600 ml 85%乙醇浸泡后加热回流3 h，滤过；药渣再用400 ml 85%乙醇加热回流3 h，滤过，合并滤液，减压浓缩成清膏5.7 g，冰箱保存。使用前用生理盐水配成0.048 g/ml、0.024 g/ml和0.012 g/ml 3个浓度，相当于生药的浓度分别为0.84 g/ml、0.42 g/ml和0.21 g/ml。
　　1.2 实验材料
　　昆明种小鼠由中国医科大学实验动物中心提供（合格证号：辽实动字第521号），体重（20±2）g，雌雄各半。H22肝癌瘤株由北京中科院药物研究所提供。5-氟尿嘧（5-FU）针剂（天津力生药厂生产，批号：051006），用前用生理盐水稀释成1 g/L。LMR-1.5/AL 日本东芝医用电子直线加速器。
　　1.3 蜂房提取物对H22荷瘤小鼠化疗的作用　　
　　在无菌条件下抽取生长良好的H22肝癌小鼠的瘤液，用生理盐水稀释成2×107个/ml的细胞悬液，0.2 ml/只，小鼠后肢皮下接种。于瘤株接种后第2天将小鼠随机分为7组，每组10只。对照组：25 ml/kg生理盐水；5-FU组：0.01 g/kg；低剂量组：蜂房提取物0.3 g/kg；中剂量组：蜂房提取物0.6 g/kg；高剂量组：蜂房提取物1.2 g/kg；5-FU加中剂量组：5-FU 0.01 g/kg加蜂房提取物0.6 g/kg；5-FU加高剂量组：5-FU 0.01 g/kg加蜂房提取物1.2 g/kg。对照组和5-FU组灌胃给予生理盐水，其余各组灌胃给相应剂量蜂房提取物，每日1次，连续15 d。除对照组和低、中、高剂量组外，于给药同时腹腔注射5-FU，每日1次，连续3 d，停药1 d，再连续给药2 d（其余各组同法给予生理盐水）。于第16天处死小鼠，取瘤称重，计算抑瘤率和增效率［3］。
　　1.4 蜂房提取物对H22荷瘤小鼠放疗作用　　
　　于瘤株接种后第2天将小鼠随机分为4组，每组10只。对照组：生理盐水；放疗组：8、9、10 Gy；放疗加中剂量组：放疗8、9、10 Gy，蜂房提取物0.6 g/kg；放疗加高剂量组：放疗8、9、10 Gy，蜂房提取物1.2 g/kg。后两组灌胃给药，每日1次，连续15 d（前两组给生理盐水）。除对照组外于给药第7天开始加放射治疗（电子线）。基础量8 Gy/d，每日1次，连续3 d，剂量递增，8、9、10 Gy。于第16天处死小鼠，取瘤称重，计算抑瘤率和增效率［3］。
　　1.5 统计学方法　　
　　实验结果采用t检验作统计分析。
　2 结果
　　2.1 蜂房提取物对H22荷瘤小鼠化疗的增效作用中、高剂量蜂房提取物对小鼠H22肝癌的生长均有明显抑制作用，抑瘤率为34.8%和38.4%，与对照组比较差异具有显著性（P＜0.05）。中、高剂量蜂房提取物对小鼠H22肝癌的5-FU治疗均有增效作用，增效率分别为24.3%和32.6%。高剂量蜂房提取物增效显著，与5-FU组比较P＜0.05，见表1。表1 蜂房提取物对H22荷瘤小鼠化疗的增效作用（略）
　　2.2 蜂房提取物对H22荷瘤小鼠放疗的增效作用中、高剂量蜂房提取物对小鼠H22肝癌的化疗均有增效作用，增效率分别为12.3%和33.3%。与对照组比较，放疗联合给药组抑瘤率差异显著（P＜0.01），见表2。表2 蜂房提取物对H22荷瘤小鼠放疗的增效作用（略）
　　3 讨论　　
　　中药蜂房用于治疗肿瘤早有记载［4］。传统的用药方法多为水煎服或外用，而且具有一定的毒副作用，因此，提取其抗肿瘤的有效成分成为中药开发的方向。蜂房的化学成分十分复杂，利用不同溶剂所得到的蜂房提取物也显示了不同的药理作用［1］。国内外的研究表明，蜂房的主要成分蜂胶对人肝癌、口腔癌、子宫颈癌、乳腺癌、胸腺癌、结肠腺癌及皮
肤癌等多种细胞株的生长都有抑制作用［5,6］。有人对蜂胶提取物抗肿瘤作用机制的研究结果表明，蜂胶的乙醇提取物能提高荷S180肉瘤小鼠的免疫系统活性［7］。目前对于蜂房抗肿瘤作用研究也多限于体外，蜂房乙醇提取物对活体肿瘤的抑制作用报道很少［8］。前期研究工作表明，蜂房的85%乙醇提取物对小鼠S180实体瘤和艾氏腹水癌均有较好的抑制作用。　　
　　本文用蜂房的85%乙醇提取物对H22肝癌荷瘤鼠进行了放化疗增效作用的研究，结果表明，蜂房提取物的1.2 g/kg、0.6 g/kg 2个剂量组与空白对照组相比，使H22肝癌小鼠的肿瘤重量显著降低（P＜0.05），抑瘤率达38.4%，且有剂量依赖关系。使5-FU化疗及电子线放疗的H22肝癌小鼠的肿瘤重量降低非常显著（P＜0.001），抑瘤率分别达61.2%和60.5%，增效率分别达32.6%和33.3%。说明蜂房乙醇提取物对H22肝癌荷瘤小鼠的放化疗有显著的增效作用。这可为进一步深入研究及药物开发所需的临床试验提供科学依据。
【参考文献】
　　［1］武鸿翔.露蜂房中化学成分的研究与临床应用概况［J］.云南中医中药杂志, 2001（3）:29-30.

　　［2］李彦.蜂房药理作用研究进展［J］.中医药信息, 2004（5）: 21-22.

　　［3］徐淑云，如廉，陈修.药理学实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1994：1432－1440.

　　［4］蔡新.蜂房治疗癌肿的临床应用［J］.江苏中医, 1993（6）: 33.

　　［5］Matsuno T, Matsumoto Y, Saito M, et al. Isolation and characterization of cytotoxic diterpenoid iso

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